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淺述細胞適應(yīng)msc無血清培養(yǎng)基的方法News
淺述細胞適應(yīng)msc無血清培養(yǎng)基的方法
更新時間:2021-08-17 點擊次數(shù):1355次
  msc無血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的產(chǎn)品含有向細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質(zhì)和清蛋白,纖維蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能,如提供細胞貼壁所需的基質(zhì),抗生物反應(yīng)器剪切力,作為脂質(zhì)和其他生長分化因子的載體等。
  下面要為大家介紹的是細胞適應(yīng)msc無血清培養(yǎng)基的方法:
  1、直接適應(yīng):細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基(SFM)中。
  一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)本產(chǎn)品。對于直接適應(yīng),接種細胞密度應(yīng)該:2.5×10~3.5×10細胞/ml。當(dāng)細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml時,傳代培養(yǎng)細胞。當(dāng)細胞密度在培養(yǎng)4到7天后達到2×10~4×10細胞/ml時,細胞*適應(yīng)了。每隔3~5天,當(dāng)細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應(yīng)了本產(chǎn)品的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
  2、連續(xù)適應(yīng):分好幾步把細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到本產(chǎn)品中,與直接適應(yīng)相比較,連續(xù)適應(yīng)趨向?qū)τ诩毎訙睾鸵恍?/div>
  (1)以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養(yǎng)物到75%有血清培養(yǎng)基:25%SFM混合培養(yǎng)基中,傳代培養(yǎng)。
 ?。?)當(dāng)細胞密度>5×10細胞/ml時,以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,在有血清培養(yǎng)基:SFM為50∶50的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
 ?。?)以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,25%有血清培養(yǎng)基和75%SFM中傳代培養(yǎng)。
 ?。?)當(dāng)細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml(接種后4到6天),在100%SFM培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
 ?。?)每隔3到5天,當(dāng)細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
  希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。

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